Achilles se educó como Asesino bajo la tutela del Mentor John de la Tour, hasta que en la década de 1740 fue enviado a las Trece Colonias. Achilles estableció su base en una hacienda (llamada Hacienda Davenport en los juegos) donde estableció una gran área de influencia, llegando a aliarse con las tribus iroquesas. También se casaría con una mujer llamada Abigail y tendría un hijo llamado Connor, pero ambos fallecieron debido a la fiebre tifoidea.

Achilles adquirió una gran obsesión con los artefactos dejados por la Primera Civilización a través de un manuscrito. Achilles envió a uno de sus pupilos, Shay Cormac, a investigar uno de los llamados «Sitios de los Precursores», lo que desencadenó el terremoto de Lisboa. Shay desertó de la Orden de los Asesinos y robó el manuscrito de Achilles para evitar que volviera a causar otro cataclismo. Shay, aliado con los Templarios de Haytham Kenway, inició una purga de Asesinos con el objetivo de evitar que descubrieran otro de los sitios de la Primera Civilización. Achilles observó cómo todos sus camaradas Asesinos morían a manos de Shay y los Templarios, y cómo él mismo era dejado con vida para evitar que otros Asesinos tuvieran la tentación de investigar los artefactos antiguos. Haytham incluso le disparó en la pierna como «recordatorio» de lo que allí había ocurrido.

Décadas después, un abatido y retirado Achilles recibe a Ratonhnhaké:ton, un mohawk que llega para saber más sobre los Precursores. Achilles instruye al joven dentro del credo de los Asesinos (le otorga el nombre de «Connor», el de su hijo fallecido) y este se convertirá en el hombre que combata contra Haytham y los Templarios de la América colonial.

Achilles morirá en 1781 debido a la vejez, siendo enterrado por Connor junto a su esposa e hijo en las cercanías de la Hacienda Davenport.

Después de que su aldea fuera destruida, aparentemente, por Templarios, Connor decide tomarse venganza y proteger a su pueblo, entrando bajo la tutela de Achilles Davenport, un Asesino de las Trece Colonias retirado. Con su ayuda, Connor inicia una caza de los Templarios, descubriendo que su propio padre es el líder de los mismos.

Faulkner empezó trabajando como mercante en la Royal Navy. Por aquel entonces entró en contacto con Achilles Davenport, líder de los Asesinos coloniales, a quien tomó en gran estima, ayudando a crear una ruta comercial entre los Asesinos coloniales y Europa. Para 1753 ingresó en la Orden de los Asesinos y como segundo de a bordo en el Aquila, el mayor buque de la flota Asesina. En 1768, con los ataques de Haytham Kenway a los Asesinos coloniales, el Aquila fue destruida; sin barco ni compañeros, Faulkner se sumió en el alcoholismo.

En 1770, Faulkner conoce a Connor, un Asesino aprendiz de Achilles que deseaba reparar el Aquila. Faulkner ejerce como tutor de Connor en el campo de la navegación y vuelve a servir como segundo de a bordo. Juntos comienzan la caza de los Templarios en los mares.

Church fue un médico relacionado con la del Temple; Haytham Kenway lo reclutó después de ayudarle a deshacerse de un esclavista llamado Silas Thatcher.

Para 1770, el Asesino Ratonhnhaké:ton lo conoció en la taberna Martha's Vineyard, mientras se hallaba hablando con el capitán Nicholas Biddle.

En 1775, Church traicionó a la Orden al comenzar a trabajar para los británicos. Creyendo que Haytham acudiría a por él, Church le tendió una emboscada en Valley Forge empleando a un doble, pero Haytham logró salir ileso gracias a la ayuda de su hijo Connor. Posteriormente, Haytham y Connor lo persiguen en el buque Aquila, llegando hasta su base en la Martinica. Haytham comenzó a interrogarle de forma brutal, furioso por su traición; Connor remató a Church.

Con un destacado linaje militar, estudió en una academia militar en Suiza y en 1754 se marchó a las Trece Colonias para servir en el ejército británico bajo el mando de Edward Braddock. En algún momento entró en contacto con la Orden del Temple, por lo que el Gran Maestre Reginald Birch le encargó reunirse con Haytham Kenway cuando este llegara a Boston. Lee resultó ser un miembro valioso al estar dentro del ejército británico, sirviendo como contacto de Haytham en el ejército. Por su lealtad y disposición, Haytham ingresa a Lee en la Orden del Temple.

15 años después, Lee se topa con un muchacho llamado Ratonhnhaké:ton. Poco después, la aldea de Ratonhnhaké:ton es incendiada, por lo que este le atribuye, erróneamente, su causa a Charles Lee y a los Templarios.

Entre 1760 y 1770, Lee permaneció en Inglaterra, luchando en distintos lugares. En 1770 regresa a Norteamérica para ayudar al Gran Maestre Haytham Kenway a instigar la Masacre de Boston. Para 1775, Lee abandona a los británicos y se une al ejército continental postulándose para comandante en jefe, compitiendo por el puesto con George Washington. Sin embargo, para disgusto de Lee, el elegido es Washington. Un año después, Lee instiga un intento de asesinato contra Washington, pero el plan es frustrado por el Asesino Connor (quien es el propio Ratonhnhaké:ton).

En 1778, Lee ordena la retirada en la Batalla de Monmouth con la esperanza de causar la derrota de Washington, aunque este triunfa gracias a la ayuda de Connor. Por su acción, Lee cae en desgracia y es suspendido temporalmente.

En 1781, tras la muerte del Gran Maestre Haytham Kenway, Lee asume de forma interina el cargo de Gran Maestre. Connor lo confronta en Nueva York, donde Lee le declara su odio por la muerte de Haytham y promete hacerle sufrir antes de matarlo. Entre Connor y Lee se desata una persecución que termina con ambos malheridos, y con Lee huyendo hasta la frontera. La confrontación termina en una taberna, donde Lee, gravemente herido, toma un trago de aguardiente, al que invita a beber a Connor. Tras unos instantes donde los dos viejos enemigos se contemplan con respeto, Connor apuñala en el corazón a Lee.

De nombre desconocido, fue un huérfano criado en Industrias Abstergo. Abstergo lo empleó como conejillo de indias para explorar su memoria genética, y Warren Vidic decidió otorgarle el nombre de «Daniel Cross». Cross se convirtió en el Sujeto 4 del Proyecto Animus, descubriendo un antepasado Asesino llamado Nikolái Orelov durante la época de la Revolución Rusa. Sin embargo, como consecuencia de su exposición prolongada al Animus, Cross tuvo problemas con el Efecto Sangrado, lo que le llevó a padecer alucinaciones y episodios de violencia, cayendo en el alcoholismo.

Al oír que su hermana Hannah se unió a la Orden de los Asesinos, Daniel llegó a contactar con el Asesino William Miles. Se reunió en Dubái con el Mentor de la Orden de los Asesinos, en el año 2000. Acompañado de su hermana, Daniel asesinó al Mentor. Sin saber muy bien por qué lo había hecho, se dio cuenta de que había sido inducido a ello por Warren Vidic durante su etapa en el Animus. Daniel decidió entonces volver a Industrias Abstergo.

Daniel fue introducido en la Orden del Temple alrededor del año 2002. Su primera misión fue en Moscú, donde tras encontrar los Códices reunidos por el Asesino Ezio Auditore, oyó por primera vez el nombre de Desmond Miles. Para 2012 ya había alcanzado el rango de Maestro y se le encargó la misión de localizar a Desmond Miles.

El primer encontronazo entre Cross y Desmond se produjo en Nueva York, cuando Desmond trataba de hacerse con uno de los artefactos de los Precursores. Posteriormente se volvieron a encontrar en Brasil, cuando Cross acudió a conseguir los artefactos. Finalmente Desmond acudió a Industrias Abstergo cuando Warren Vidic secuestró a su padre, viéndose las caras por tercera vez con Cross; este comenzó a sufrir los efectos del Efecto Sangrado al estar cerca del Fruto del Edén, lo que aprovechó Desmond para eliminarlo.

Protagonista del prólogo del juego Assassin's Creed III, Haytham llega a la Boston colonial para formar una célula Templaria en las Trece Colonias y buscar el Gran Templo de los Precursores. Con la ayuda de una mohawk llamada Kanieh:tío y de sus hermanos Templarios, Haytham consigue llegar a la entrada del Gran Templo, pero se ve incapaz de acceder.

La influencia Templaria en las Trece Colonias es destruida por el Asesino Connor, hijo suyo y de Kanieh:tío. Pese a que Haytham trata de hacer entender a su hijo lo erróneo de sus ideales, Connor decide combatir a los Templarios, a los que cree responsables de la destrucción de su aldea y la muerte de su madre. Padre e hijo terminan enfrentándose, resultando en la muerte de Haytham.

Criado en Escocia, Pitcairn se trasladó a América al estallar la Guerra de los Siete Años, alcanzando el rango de capitán. Para 1754, Pitcairn se unió a la Orden del Temple.

Haytham Kenway contacta con él al llegar a Boston, debido a que Pitcairn se hallaba al mando del general Edward Braddock.

Convertido en Mayor en 1771, y general al estallar la guerra civil, Pitcairn comanda a los británicos que marchan hacia Lexington y en la posterior Batalla de Bunker Hill. El Asesino Connor se infiltra en el campamento y elimina a Pitcairn cuando se hallaba dando instrucciones a sus hombres. Pese a todo, Pitcairn confiesa que su intención era firmar la paz con Washington y las tropas coloniales.

Nacido en Filadelfia, en 1770 se unió a la Royal Navy, donde conocería a Robert Faulkner.

El Templario Benjamin Church contactó con él e hizo que se uniera a la Orden del Temple. Al mismo tiempo, Biddle se convertía en uno de los capitanes de la Armada Colonial cuando estalló la Guerra de Independencia Estadounidense.

El Asesino Connor Kenway rastreó a Biddle por toda la Costa Este de los Estados Unidos. En 1778, el buque de Connor, el Aquila, y el de Biddle, el Randolph, se enfrentaban. Connor y Biddle se enfrentaron, con victoria para el primero. Con su último aliento, Biddle le rogó a Connor que no dejara al Randolph como un trofeo, permitiendo que el capitán se hundiera junto a su nave; Connor respetó su último deseo.

Hickey nació en Irlanda y se unió al ejército británico, estableciéndose en América en 1752. Tras unirse como asistente de un Templario llamado William Johnson, se unió a la Orden en 1754.

Hickey es uno de los Templarios con los que Haytham Kenway contacta nada más llegar a Boston. Hickey es conocido como un hombre de acción, encargado de los asuntos relacionados con los bajos fondos de los Templarios.

Para 1776, Hickey recibe órdenes de asesinar a George Washington, con el objetivo de que, tras su muerte, Charles Lee ocupe su lugar como comandante del ejército colonial. Hickey trata de emplear al Asesino Connor como cabeza de turco. Tras ser condenado a la horca, Connor consigue librarse y matar a Hickey antes de que pudiera asesinar a Washington.

Nacido en Irlanda, William Johnson se trasladó a las Trece Colonias donde empezó a comerciar con la tribu mohawk de los Kanien'kehá:ka. Con el tiempo, Johnson se convirtió en un adinerado terrateniente.

En 1748 ingresó en la Orden del Temple. Se une a Haytham Kenway cuando este llega a Boston.

Reaparece en la precuela de Assassin's Creed: Rogue, colaborando con Shay Cormac por obtener uno de los artefactos de los Precursores.

Braddock se unió a la Orden del Temple bajo el auspicio del Gran Maestre Reginald Birch. En 1735 conocería a Haytham Kenway, con quien trabaría amistad. Posteriormente combatió en los Países Bajos.

Viendo cómo Braddock se había convertido en un hombre despiadado e inmisericorde, Haytham decidió alejarse de él, afirmando que Braddock había abandonado los preceptos de la Orden.

Para 1754, Braddock se trasladó a Boston, revelándose que había abandonado a la Orden. Haytham también llegaría allí posteriormente, con la intención de establecer una base Templaria en las Trece Colonias.

En 1755, durante la Expedición Braddock, Braddock y sus hombres tenían el objetivo de detener el ataque francés sobre Fort Duquesne. En la expedición se infiltró el propio Haytham, que se disponía a eliminarlo. Con ayuda de una mohawk llamada Kaniehtí:io, Haytham persiguió y cazó a Braddock. Antes de eliminarlo, Haytham le arrebató su anillo Templario; Braddock moriría poco después de las heridas recibidas.

George Washington nació en la Virginia colonial, su hermano mayor Lawrence fue un Templario asesinado por el Asesino Shay Cormac. En 1754 se unió a la milicia de Virginia, estando bajo el mando del general Edward Braddock en la Guerra de los Siete Años.

Washington conoce al Asesino Ratonhnhaké:ton (también conocido como Connor) en 1775, cuando en Filadelfia es nombrado comandante en jefe del ejército continental. Se muestra que mantiene una rivalidad con Charles Lee, un Templario que aspiraba a obtener dicho puesto. Connor incluso desmantelará una conspiración Templaria para asesinar a Washington y que así Lee pudiera hacerse con el mando del ejército.

En 1778, Connor, con la ayuda de su padre, el Gran Maestre Templario Haytham Kenway, descubre que fue Washington quien dirigió el ataque sobre su aldea e indirectamente causó la muerte de su madre. Por entonces se libraba la Batalla de Monmouth, en la que Connor forma parte activa ayudando a los fuerzas coloniales a vencer a los británicos. Tras enterarse de que Lee los ha traicionado en la batalla, Connor le recomienda a Washington que acabe con él, y afirma que será la última vez que luche a su lado.

En 1780, Connor advierte a Washington de la traición de Benedict Arnold, y al año siguiente incluso obtiene el Fruto del Edén, pero temeroso de su poder, le pide a Connor que se deshaga de él.

Israel Putnam tuvo una vida agitada: sirvió con los británicos durante la Guerra de los Siete Años, fue capturado por los Kanien'kehá:ka en 1758, participó en la Toma de La Habana y fundó una compañía contraria a las políticas británicas en Connecticut. Al estallar la guerra civil fue nombrado general de las fuerzas de Connecticut.

Putnam conoce al Asesino Connor en 1775, durante la Batalla de Bunker Hill, cuando Connor se disponía a eliminar al Templario John Pitcairn. Un año después vuelven a reencontrarse cuando Connor evita la conspiración para asesinar a George Washington.

Considerado el segundo de Washington, su escaso talento táctico le llevó a caer en desgracia tras la Batalla de Long Island, y una parálisis le obligó a abandonar el ejército. Falleció en Connecticut en 1790.

Nacido y criado en la misma aldea que Ratonhnhaké:ton, ambos fueron compañeros de juegos y aventuras. La llegada de los colonos pronto supuso un problema para su aldea, y cuando estalla la Guerra de los Siete Años parece que la aldea tendrá que verse involucrada de una forma u otra.

Kanen'tó:kon acude a buscar a Ratonhnhaké:ton para ir a contarle los planes del Templario William Johnson. Posteriormente, la aldea decide aliarse con los británicos ante un posible ataque de las fuerzas estadounidenses de George Washington; el Templario Charles Lee les convenció de que Ratonhnhaké:ton los había traicionado al aliarse con Washington. Kanen'tó:kon confronta a Ratonhnhaké:ton acusándole de su traición, aunque este afirma que están siendo manipulados por Lee. Ambos comienzan a pelear, hasta que Ratonhnhaké:ton se ve obligado a matarlo; con su último aliento, Kanen'tó:kon afirma que los estadounidenses serán derrotados y eso asegurará el futuro de la aldea.

Kaniehtí:io fue la hija de la Madre del Clan y fue educada para que ocupara su lugar llegado el momento. Kaniehtí:io experimentó visiones sobre la llegada de los colonos a sus tierras.

Durante la Guerra de los Siete Años, Kaniehtí:io es capturada por los británicos y llevada prisionera a Boston. Sin embargo, es liberada por el Templario Haytham Kenway, quien pide su ayuda para localizar uno de los reductos de los Precursores. Pese a la desconfianza que sentía Kaniehtí:io por Haytham, ambos establecen una frágil y curiosa alianza, colaborando juntos para eliminar al comandante británico Edward Braddock.

Después de visitar la entrada al reducto de los Precursores, Kaniehtí:io y Haytham se convierten en amantes y fruto de ello queda embarazada. Su relación durará poco, cuando Kaniehtí:io descubre que Haytham es un Templario y cuando descubre que Haytham no mató a Braddock, y que solo lo dejó malherido.

Kaniehtí:io decide criar a su hijo sola en su aldea. Cierto día, la aldea es atacada y Kaniehtí:io muere frente a los ojos de Ratonhnhaké:ton al quedar atrapada bajo los escombros de una cabaña. Si bien Ratonhnhaké:ton creyó que el ataque fue perpetrado por los Templarios, lo cierto es que fue dirigido por las tropas de George Washington.

Nacido en una rica familia de Boston, durante su juventud conoció al Asesino Achilles Davenport. Elegido por Massachusetts, Adams se oponía a las políticas fiscales de los británicos sobre las Trece Colonias.

Adams tuvo un papel preponderante durante el Motín del té, colaborando además con Connor.

El Asesino Connor Kenway visita las ruinas de su residencia en 1776 (tres años después de su muerte), en busca de un fragmento del mapa del tesoro de William Kidd, que había caído en manos de Hutchinson. Finalmente, Connor recupera el pedazo del mapa tras resolver una serie de acertijos en el interior de la mansión.